本試劑盒僅供研究使用。 伏馬毒素ELISA試劑盒使用目的: 本試劑盒用于飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),雞蛋、蜂蜜、牛奶、血 清和尿樣中伏馬毒素(FB1)殘留的定量檢測。 伏馬毒素ELISA試劑盒實驗原理 本試劑盒采用競爭ELISA 方法,在微孔板包被有伏馬毒素(FB1)偶聯抗原,加入伏 馬毒素(FB1)標準品或樣品,游離伏馬毒素(FB1)與微孔條上預包被的伏馬毒素(FB1) 偶聯抗原互相競爭抗伏馬毒素(FB1)抗體酶標記物,用TMB 底物顯色,加入終止液后顏 色由藍色變為黃色,用酶標儀在450nm 波長下進行檢測,吸光值與樣品中伏馬毒素(FB1) 含量成反比,通過標準曲線計算樣品中伏馬毒素(FB1)的含量。 伏馬毒素ELISA試劑盒組成 預包被的伏馬毒素(FB1)偶聯抗原的可拆酶標板:1 塊(12 孔×8 條)。 伏馬毒素(FB1)標準品:6 瓶(1ml/瓶),含量分別是: 0 ppb,0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7 ppb,8.1 ppb。 抗伏馬毒素(FB1)抗體酶結合物:1 瓶(6ml)。 顯色液A:1 瓶(6ml)。 顯色液B:1 瓶(6ml)。 終止液:1 瓶(6ml),2M 硫酸。 樣本稀釋液:1 瓶(10×, 6ml),用于樣品稀釋用。 濃縮洗滌液:1 瓶(20×,20ml),用于洗板。 說明書一份。 伏馬毒素ELISA試劑盒貯存: 1.試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍 2.未用完的微孔板應該密封干燥保存 伏馬毒素ELISA試劑盒注意事項 1.使用試劑盒前請仔細閱讀說明書。 2.不要使用過期試劑盒。 3.試劑盒使用前,將試劑恢復至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時。 4.標準品中含有伏馬毒素(FB1),使用時應特別注意,操作時應帶手套。 5.終止液中含有硫酸,使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。 6.不同標準品、樣品所用吸頭不能混用,否則會影響試驗結果。 7.不同批號試劑盒中的試劑不得混用;不同標準品、樣品所用吸頭不得混用,否則會影響 實驗結果。 8.稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會影響實驗結果 9.混合試劑時應避免起泡。 伏馬毒素ELISA試劑盒工作液準備 伏馬毒素(FB1)標準品溶液:0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb 濃縮洗滌液:用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用 樣本稀釋液:備用 顯色劑:已備用,避免光線直照 反應終止液:已備用 伏馬毒素ELISA試劑盒樣品處理: 取10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液 強力振蕩3分鐘 用Whatman 濾紙過濾 取25μl處理后的樣品,加入25μl樣本稀釋液于反應孔中(樣本稀釋倍數為2) 伏馬毒素ELISA試劑盒結果計算 定量分析: 所獲得的每個濃度標準溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以*個標準(0標準) 的吸光度值(B0)再乘以100%,即百分吸光度值。 B— 標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值 B0— 0μg/L標準溶液的平均吸光度值 以伏馬毒素(FB1)濃度的對數值為X軸,百分吸光度值為Y軸,繪制標準曲線圖。根 據樣品百分吸光度值,可從曲線上得到對應點的橫坐標,即為伏馬毒素(FB1)濃度的對數 值,求得反對數即為測定液中伏馬毒素(FB1)濃度C(ppb) 由于樣品經過了預先稀釋,因此根據標準曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋 倍數。 半定量測定: 目測半定量測定:首先選擇一個適當的標準液與樣品同運行,根據樣品與標準品吸光 度值的高低比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。 儀器半定量測定:首先選擇一個適當的標準液與樣品同運行,根據樣品與標準品顏色 深淺比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。 |