趨化因子(C-X-C基序)配體1(CXCL1)是一個小分子量細胞因子,屬于CXC趨化因子家族,以前又被稱為GRO1致癌基因、GROα、KC和中性粒細胞激活蛋白3(NAP-3)。那么在ELISA實驗中有哪些注意事項呢,恒遠生物小編為大家總結ELISA實驗操作注意事項。
檢測范圍:
12ng/L - 420ng/L
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中CXC趨化因子配體1(CXCL1)含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人CXC趨化因子配體1(CXCL1)水平。用純化的人CXC趨化因子配體1(CXCL1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入CXC趨化因子配體1(CXCL1),再與HRP標記的CXC趨化因子配體1(CXCL1)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CXC趨化因子配體1(CXCL1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人CXC趨化因子配體1(CXCL1)濃度。
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
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